コロナ遺伝子情報の解析はかなり前から中国で進んでいる。しかし、それが直接的・生物学的ににコロナを同定しているものではないことを新年早々にコロナは存在しない、唯の人工遺伝子情報に書いた。ワクチン接種による障害・死亡例が続々と海外から挙がってきている中、遺伝子ワクチンの導入が前のめりで進んでいる事への警鐘喚起のつもりだが、ここに来て、すでに2008年に米国微生物学会にSARS-COV-2は論文掲載されていたことについての情報です。記事は、https://europepmc.org/article/PMC/2395109
になります。この記事を踏まえれば、COVID-19は新型ウイルスとは言いがたく、武漢での2019年に発見されたという新型ウイルスというのは２番煎じの焼き直しとも言える。この中にはCOV-2のプライマーも記載されており、2019年にWHO命名のCOVID-19（SARS-COV-2）との関連はどうなっているのか。
以下の英文翻訳出典は専門語に関しては、必ずしも正確ではないが、詳細はhttps://europepmc.org/article/PMC/2395109をご覧下さい。
（, 27 Feb 2008）
pdf論文:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2395109/pdf/2248-07.pdf/?tool=EBI
2プラスミド共発現系によって生成された長いキメラRNA配列を含むRNase耐性ウイルス様粒子。（RNase-resistant virus-like particles containing long chimeric RNA sequences produced by two-plasmid coexpression system）
外因性RNA配列(装甲RNA)を含むRNase耐性、非感染性ウイルス様粒子は、RNAウイルス検出におけるRNA制御および基準として有力な候補です。しかし、ウイルス様粒子中に高効率で包まれるRNAの長さは、通常500塩基未満である。本研究では、装甲L-RNAを製造する方法について述べている。装甲L-RNAは、1つのプラスミドからコートタンパク質とマトゥラーゼを発現させ、改変MS2ステムループ(pac site)を用いた標的RNA配列を別のプラスミドから転写する2プラスミド共発現系の誘導により、大腸菌で産生されるMS2バクテリオファージコートタンパク質とRNAの複合体である。C型肝炎ウイルス6個の遺伝子断片を含む2,248塩基の3V装甲L-RNA、 重症急性呼吸器症候群コロナウイルス(SARS-CoV1、SARS-CoV2、SARS-CoV3)、鳥インフルエンザウイルスマトリックス遺伝子(M300)、H5N1鳥インフルエンザウイルス(HA300))は、2プラスミド共発現システムによって発現され、全ての装甲RNAの特徴を有することが実証された。我々は、3V装甲L-RNAを複数のウイルスアッセイの校正器として評価した。WHO HCV RNA(NIBSC 96/790)国際規格を用いて、10倍の連続希釈で希釈したキメラ装甲L-RNAを較正し、10(6)から10(2)のコピーを含むサンプルを得ました。
結論として、装甲L-RNA調製に用いたアプローチは実用的であり、多重RNAウイルスアッセイにおける品質管理の労力とコストを削減できる可能性があります。さらに、キメラ装甲RNAを定量的検出用の国際単位に当てることができます。
RNase-resistant, noninfectious virus-like particles containing exogenous RNA sequences (armored RNA) are good candidates as RNA controls and standards in RNA virus detection. However, the length of RNA packaged in the virus-like particles with high efficiency is usually less than 500 bases. In this study, we describe a method for producing armored L-RNA. Armored L-RNA is a complex of MS2 bacteriophage coat protein and RNA produced in Escherichia coli by the induction of a two-plasmid coexpression system in which the coat protein and maturase are expressed from one plasmid and the target RNA sequence with modified MS2 stem-loop (pac site) is transcribed from another plasmid. A 3V armored L-RNA of 2,248 bases containing six gene fragments-hepatitis C virus, severe acute respiratory syndrome coronavirus (SARS-CoV1, SARS-CoV2, and SARS-CoV3), avian influenza virus matrix gene (M300), and H5N1 avian influenza virus (HA300)-was successfully expressed by the two-plasmid coexpression system and was demonstrated to have all of the characteristics of armored RNA. We evaluated the 3V armored L-RNA as a calibrator for multiple virus assays. We used the WHO International Standard for HCV RNA (NIBSC 96/790) to calibrate the chimeric armored L-RNA, which was diluted by 10-fold serial dilutions to obtain samples containing 10(6) to 10(2) copies. In conclusion, the approach we used for armored L-RNA preparation is practical and could reduce the labor and cost of quality control in multiplex RNA virus assays. Furthermore, we can assign the chimeric armored RNA with an international unit for quantitative detection.
上記のVIDEOは、動画で説明しており解りやすい。必見です。
